產品搜索

產品分類

聯系人：蔣經理
電話：4008750250
手機：18066071954
地址：南京市棲霞區緯地路9號
Email： zhangxiangwen@cobioer.com

原載自：www.diyiqukuai.com.cn[行情動態] 2019-04-03 瀏覽次數：1297

　　我們來了解下ATCC細胞的活化方式吧

　　ATCC細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。

　　傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

　　ATCC細胞的細胞活化方式：

　　1.冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。

　　2.細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。

　　3.材料：37℃恒溫水槽、新鮮培養基、無菌吸管/離心管/培養瓶、液氮或干冰容器。

　　ATCC細胞的解凍：

　　(1)操作人員應戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

　　(2)自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

　　(3)將新鮮培養基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。

　　(4)取出冷凍管，立即放入37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，以70%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內。

　　(5)取出解凍之細胞懸浮液，緩緩加入有培養基之培養容器內(稀釋比例為1：10-1：15)，混合均勻，放入CO2培養箱培養。取0.1ml解凍細胞懸浮液作存活測試。

　　(6)解凍后是否立即去除冷凍保護劑，依細胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑。倘若要立即去除，則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10ml培養基之離心管內，離心1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養基，混合均勻，放入CO2培養箱培養。

　　(7)若不需立即去除冷凍保存劑，則在解凍培養后隔日更換培養基。