產品搜索
聯系我們
聯系人:蔣經理
電話:4008750250
手機:18066071954
地址:南京市棲霞區緯地路9號
Email: zhangxiangwen@cobioer.com
電話:4008750250
手機:18066071954
地址:南京市棲霞區緯地路9號
Email: zhangxiangwen@cobioer.com
新聞動態 / news
ATCC細胞的復蘇事項可要看好了!
原載自:www.diyiqukuai.com.cn[行情動態] 2019-03-07 瀏覽次數:1314
ATCC細胞的復蘇事項可要看好了!
ATCC細胞復蘇的原則:
在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。
ATCC細胞的復蘇事項:
1.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例,配置相應的*培養基,確保細胞培養條件與說明書一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,應自行承擔。每株細胞2支凍存管復蘇時建議先只復蘇一支,若復蘇出現問題請及時與廠家取得聯系。
2.取出凍存管,浸入37溫水浴中,并不時搖動令其盡快融化,注意管口不要沒入水面以下,以免造成污染。
3.從37水浴中取出凍存管,用75%酒精擦拭凍存管表面,放入超凈臺內。吸出細胞懸液,轉移至培養瓶內,補加6-8mL培養液,37溫箱靜置培養,隔天換新鮮培養液,以去除DMSO,或者復蘇當時離心去除DMSO,并在顯微鏡下觀察細胞狀態和密度;對于貼壁展開較慢的細胞,建議復蘇當時去除DMSO,待細胞貼壁展開后再換液(原代細胞:細胞懸液離心后觀察管底沉淀初步判斷細胞量,后行臺盼藍染色以確定細胞存活率;接種后隔天觀察細胞貼壁量,以判定細胞貼壁率)。
4.貼壁細胞
過夜培養后多數細胞會重新貼壁,待匯合度80%左右時正常傳代。若細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。如臺盼藍染色證實細胞活力正常則1000rpm離心3-5min收集細胞,用新鮮培養基重懸后移回培養瓶內重新貼壁培養。
5.懸浮細胞
過夜培養后多數細胞會逐漸恢復活力,有光澤、飽滿。若細胞光澤暗淡,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。
6.建議在收到細胞后每天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于菌種的查詢。
上一篇 : 我們來了解下ATCC細胞的活化方式吧 下一篇 : 一文了解ATCC細胞培養的優點