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ATCC細胞株保溫的方式

原載自:www.diyiqukuai.com.cn[行情動態]  2016-02-22  瀏覽次數:1671

   ATCC細胞株保溫的方式除有的儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。
  ATCC細胞株溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1~2小時,產物的生成可達。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過*,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA試劑盒中一般不予采用。
  怎樣才能知道我購買的ATCC細胞株質量怎么樣、是否為偽劣產品?現在市場上有很多利用偽劣細胞株坑害科研工作者,唯利是圖,直接無視科學研究的嚴謹性。那么我們要如何去判斷一個ATCC細胞株產品的質量呢?下面一起來看看細胞株內在質量檢測方法大曝光!
  *、利用干擾實驗即可辨別ATCC細胞株是否檢測目的抗原具體方法如下:
  1.將針對細胞株特異性的重組蛋白抗原和細胞株中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液2.37℃孵育15分鐘后,ATCC細胞株代替原細胞株3.后續操作按照ATCC細胞株說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物4.實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和細胞株抗體不匹配,細胞株檢測抗體針對的是非目的抗原,ATCC細胞株該細胞株為偽劣假造細胞株。
  5.如果標準曲線無線性,則說明細胞株檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際細胞株抗體的檢測作用,則該細胞株檢測抗體針對的是目的抗原。
  ATCC細胞株濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。ATCC細胞株室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
 

 

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