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技術文章 / article
細胞株培養傳代時的指數增生期解讀
原載自:www.diyiqukuai.com.cn[技術資料頻道] 2021-01-15 瀏覽次數:1416
細胞株的培養所謂細胞“一代”系僅指從細胞接種到分離再培養時的一段時間,這已成為培養工作中的一種習慣說法,它與細胞倍增一代非同一含義。如某一細胞系為第153代細胞,即指該細胞系已傳代153次。它與細胞世代或倍增不同。在細胞一代中,細胞能倍增3-6次。
細胞株培養時指數增生期是細胞增值旺盛的階段,細胞分裂相增多。指數增生期細胞分裂相數量可作為判定細胞生長旺盛與否的一個重要標志。一般以細胞分裂表示,即細胞群中每1000個細胞中的分裂相數。體外培養細胞分裂指數受細胞種類、培養液成分、pH、培養箱溫度等多種因素的影響。一般細胞的分裂指數介于0.1%-0.5%,初代細胞分裂指數低,連續細胞和腫瘤細胞分裂指數可高達3%-5%。pH和培養液血清含量變動對細胞分裂指數有很大影響。指數增生期是細胞一代中活力好的時期,因此是進行各種實驗好的和主要的階段。
在接種細胞數量適宜情況下,指數增生期持續3-5天后,隨細胞數量不斷增多、生長空間漸趨減少、后細胞相互接觸匯合成片。細胞相互接觸后,如培養的是正常細胞,由于細胞的相互接觸能抑制細胞的運動,這種現象稱接觸抑制。而惡性細胞則無接觸抑制現象,因此接觸抑制可作為區別正常與癌細胞標志之一。腫瘤細胞由于無接觸抑制能繼續移動和增殖,導致細胞向三維空間擴展,使細胞發生堆積。細胞接觸匯合成片后,雖發生接觸抑制,只要營養充分,細胞仍然能夠進行增殖分裂,因此細胞數量仍在增多。但當細胞密度進一步增大,培養液中營養成分減少,代謝產物增多時,細胞因營養的枯竭和代謝物的影響,則發生密度抑制,導致細胞分裂停止。因此細胞接觸抑制和密度抑制是兩個不同的概念,不應混淆。